| 维生素检验之串联质谱技术 |
| 发布时间:2017-02-04 15:05:47 | 浏览次数： |
知识背景 自二胎政策放开以来，包括高龄产妇在内的孕产妇队伍不断壮大，每个家庭追求高质量生育的要求越来越强烈：孕期不错过任何一项医院开展的检验检查，如唐氏筛查、彩超畸形筛查、妊娠期糖尿病筛查（OGTT 实验）、TORCH 筛查、遗传性耳聋基因检测、孕晚期每周一次的胎心监护等等，孕妇经常在做完检查后会问医生：“还有没有应该查的项目？”。其实孕产妇也应该进行维生素检测。 现状及意义 谈到维生素，大家可能对其重视程度不够，但维生素确实和我们的健康关系十分密切，一个简单的经历可以让我们重视维生素检测的意义：出生2个月的婴儿，出现哮喘症状，很多人会首先想到是否因为感染引起的支气管炎或肺炎等等，使用了多种药物后，仍不见起色，结果竟是由于缺钙引起的，众所周知缺钙是由于维生素 D 缺乏导致的，可见维生素检验意义重大。 维生素是人体的重要生命元素。维生素种类很多，包括维生素 B1（硫胺素）、维生素 B2（核黄素）、维生素 B3（烟酸）、维生素 B12、维生素 A、维生素 D、维生素 E、维生素 K 等等。本文以维生素 D 为例，说明维生素检测在孕产妇及新生儿人群中的意义。 维生素 D 缺乏会导致佝偻病等骨科疾病最为熟知，然而孕妇维生素 D 缺乏带来的疾病隐患同样不容小觑。由于产前孕妇多缺乏户外活动，接受日照时间少，加之妊娠期胎儿生长发育需要以及双胎等因素的影响，很多孕妇在妊娠期间会出现维生素 D 不足的现象。 维生素 D 在人体内参与多条代谢代谢途径：如钙 - 磷代谢。维生素 D 缺乏会导致严重的后果，特别对于妊娠期女性而言会导致：新生儿延迟性低血钙、增加后代早年Ⅰ型糖尿病、婴儿期变态反应性疾病、婴儿下呼吸道合胞病毒感染、一定程度加大儿童语言障碍发生风险等等，有最新的研究表明维生素 D 缺乏会导致心脏病、糖尿病、自身免疫性疾病、几种类型的肿瘤。有研究还表明，在妊娠早期，若维生素 D 浓度 < 37.5 nmol/L（即 15 ng/mL），孕妇患妊娠高血压几率会增加5倍。 在临床工作中应重点关注以下几个话题：对于妊娠糖尿病患者普遍存在维生素 D 缺乏，并且维生素 D 缺乏是导致胰岛素抵抗的重要原因之一，及时检测 25（OH）D3 浓度，采取相应措施，对防治妊娠糖尿病具有一定的意义，临床上可以通过调节维生素D水平对妊娠期糖尿病的发病或血糖水平进行干预。 大量的动物和人群研究表明维生素D在免疫系统、肺器官发育以及抗炎方面的作用。对于哮喘患儿，补充维生素 D 可以增加地塞米松对于哮喘的免疫调节作用。孕期维生素D与剖宫产、死产、孕妇阴道感染、牙周炎、神经系统发育异常等不良妊娠结局有关。因此，将维生素D纳入产前筛查的项目是一项关键性的工作。 《维生素D缺乏性佝偻病防治建议》中指出：如有条件孕妇，妊娠3个月应检测血液维生素D浓度。如果出现维生素D缺乏现象，可以适当补充维生素D制剂改善并维持到正常水平。美国内分泌学会 2011 年发布的《维生素D缺乏评估、治疗和预防的临床实践指南》认为，外周血血清 25- 羟维生素D水平 < 20 ng/mL 者应被诊断为维生素D缺乏。维生素D对于人体的意义重大，因此开展孕期检测极其关键。 技术手段 通过维生素D检测的意义，可知多种维生素检测在孕产妇和新生儿中意义重大。由于部分维生素稳定性较差，如何准确检测维生素水平，就显得尤为重要，这也成为维生素检验讨论的焦点话题。其中在临床检验和临床实践中存在的一个主要问题：准确度和精密度的问题，此外还需具备良好灵敏度正确识别维生素D高度缺乏患者。 目前，在临床检验中主要的检测方法有：液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）、罗氏电化学发光免疫分析法。检验医学溯源联合委员会将 LC-MS/MS 认为维生素D检测的「金标准」，质谱法是使用脱水离子作为母离子，重现性与准确度较高。 串联质谱技术是检验领域一项用途广泛的技术，其检测范围宽、能检测样本中极微量的物质浓度。检测标本可以是孕产妇血清样本、脐带血清样本，通过离心、去蛋白、加内标等环节上机检测，分析方法包括定量和半定量两种方法。 由于血液中含有大量的纤维蛋白，加之串联质谱仪管路极细，做好进样针、管路、喷雾针的清洗，对保证检测结果的准确性非常关键。 在检测过程中还要保证充足的试剂耗材供应：高纯度的氮气、色谱级甲醇（或者一定比例的甲醇水，用来冲洗管路）、流动相等等。作为实验人员要密切关注仪器运行状态，确保液相和质谱能够处于最佳实验状态，还要关注样本检测峰形的好坏。 维生素缺乏将严重影响孕产妇和婴幼儿健康。因此，为确保母婴健康，维生素筛查非常关键，做到早发现、早治疗。身为检验人员，应不断总结学习，保证维生素检测结果的准确性，配合临床医生，把孕产妇及婴幼儿维生素检测这项工作做好。 |
